欧美一区二区福利视频-亚洲中文一区二区av-午夜在线免费观看黄片-18成人福利网站在线观看

產(chǎn)品列表PRODUCTS LIST

首頁 > 技術(shù)與支持 > 簡述白色念珠菌PCR試劑盒反應(yīng)的要素
簡述白色念珠菌PCR試劑盒反應(yīng)的要素
點(diǎn)擊次數(shù):869 更新時(shí)間:2022-07-26
  白色念珠菌PCR試劑盒因其操作簡單,靈敏度高,特異性好,經(jīng)濟(jì)安全等特點(diǎn)而在臨床上廣泛應(yīng)用,但是由于其操作步驟復(fù)雜,一般包括試劑準(zhǔn)備,樣本收集,加樣,溫育,洗滌,顯色,比色,結(jié)果判定等,其中任何一項(xiàng)操作不當(dāng)都會(huì)對檢測結(jié)果產(chǎn)生很大影響。
 
  今天咱們來了解下白色念珠菌PCR試劑盒反應(yīng)的要素:
 
  引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
 
  1、引物長度:15-30bp,常用為20bp左右。
 
  2、引物擴(kuò)增跨度:以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
 
  3、引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
 
  4、避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
 
  5、引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
 
  6、引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn),被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn),這對酶切分析或分子克隆很有好處。
 
  7、引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
 
  8、引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
宿松县| 大名县| 绥宁县| 吴桥县| 中阳县| 甘孜县| 周宁县| 马山县| 砚山县| 资中县| 海原县| 焦作市| 沅陵县| 克什克腾旗| 涪陵区| 济南市| 海门市| 济南市| 司法| 克什克腾旗| 大宁县| 海林市| 龙胜| 瓮安县| 虎林市| 简阳市| 定州市| 上饶县| 松溪县| 封开县| 孙吴县| 房产| 宝清县| 淮阳县| 南木林县| 章丘市| 句容市| 海伦市| 屯留县| 榆树市| 定兴县|